更新時(shí)間:2024-09-26
多重?zé)晒饷庖呓M化檢測(cè)與顯色法多重免疫組化不同,多重?zé)晒饷庖呓M化(mIHC)是基于酪胺信號(hào)放大( Tyramide Signal Amplification,TSA)技術(shù),可實(shí)現(xiàn)在同一組織切片樣本上對(duì)多個(gè)靶標(biāo)進(jìn)行區(qū)別標(biāo)記,進(jìn)而分析組織微環(huán)境中蘊(yùn)含的復(fù)雜信息。
多重?zé)晒饷庖呓M化檢測(cè)(mIHC):
主要的技術(shù)原理來(lái)自TSA技術(shù),TSA即酪酰胺信號(hào)放大(Tyramide signal amplification)是一類利用辣根過(guò)氧化酶(HRP)對(duì)靶蛋白或核酸進(jìn)行高密度原位標(biāo)記的酶學(xué)檢測(cè)方法。
多重?zé)晒饷庖呓M化檢測(cè)技術(shù)可與高性能染料Alexa Fluor®、傳統(tǒng)熒光染料和比色檢測(cè)系統(tǒng)相兼容。 TSA主要原理是利用酪胺Tyramide的過(guò)氧化物酶反應(yīng)(酪胺鹽在HRP催化H202下形成共價(jià)鍵結(jié)合位點(diǎn)),產(chǎn)生大量的酶促產(chǎn)物,該產(chǎn)物能與周圍的蛋白殘基(包括色氨酸、組氨酸和酪氨酸殘基)結(jié)合,這樣在抗原-抗體結(jié)合部位就有大量的生物素沉積,與隨后加入的Streptavidin—HRP/熒光基團(tuán)結(jié)合,經(jīng)幾次這樣的循環(huán)放大,可以結(jié)合大量的酶分子or熒光基團(tuán),結(jié)果使其檢測(cè)信號(hào)得到幾何級(jí)放大。
多重?zé)晒饷庖呓M化檢測(cè)優(yōu)勢(shì):
1.高科研價(jià)值:分人、鼠兩個(gè)系列,方便在小鼠腫瘤模型和人樣品上進(jìn)行平行實(shí)驗(yàn),進(jìn)行轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究;
2.高兼容性:選用熒光染料標(biāo)記適用于所有配備了紫外、FITC、CY3、CY5 等波段帶熒光的顯微鏡、共聚焦顯微鏡和熒光切片掃描設(shè)備;
3.穩(wěn)定性:加樣過(guò)程無(wú)需避光操作,樣品染色完4度保存半年,-20℃保存一年,熒光依然滿足拍照需求;
4.方便性:所有抗體都經(jīng)過(guò)篩選,特異性好,染色濃度均經(jīng)過(guò)優(yōu)化,減少研究者自己摸條件的過(guò)程。
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